Células de linfoma humano su - DHL - 16

Tratamiento celular:

1) recuperación de células congeladas:

El criodepósito que contiene 1 ml de suspensión celular se sacude rápidamente y se descongela en un baño de agua a 37 ° c, y se mezcla uniformemente en el tubo centrífuga que contiene un medio de cultivo de 4 - 6 ML. Centrifugar durante 3 - 5 min a 1000 rpm, descartar el sobrenadante y suspender las células en el medio de cultivo. A continuación, la suspensión celular se agregó al frasco de cultivo (o placa de petri) que contenía 6 - 8 ml de medio de cultivo para cultivar a 37 ° C durante la noche. Al día siguiente, se observó el crecimiento celular y la densidad celular bajo el microscopio.

2) transmisión celular: si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede realizar el cultivo de transmisión.

Para la transmisión de células adherentes, se pueden consultar los siguientes métodos:

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 0,25% (w / v) - 0,53 mm EDTA al frasco de cultivo (t25 1 - 2 ml, T75 2 - 3 ml), colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir durante 1 - 2 minutos (las células difíciles de digerir pueden prolongar adecuadamente el tiempo de digestión), y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, si la mayoría de Las células se redondean y se desprenden, llevarlo rápidamente de vuelta a la Mesa de operaciones y añadir 3 - 4 ml de medio de cultivo con un 10% de FBS después de golpear ligeramente el frasco para terminar la digestión.

3. mezclar suavemente y aspirar, centrifugar durante 3 - 5 min a 1000 rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien. Dividir la suspensión celular en un nuevo vial t25 en una proporción de 1: 2, añadir 6 - 8 ml de un nuevo medio de cultivo configurado de acuerdo con los requisitos de las instrucciones para mantener la vitalidad del crecimiento celular, y la transmisión posterior se realiza en una proporción de 1: 2 a 1: 5 de acuerdo con la situación real.

3) Criopreservación celular: después de recibir la célula, se recomienda congelar un lote de semillas celulares durante las tres primeras generaciones de cultivo para su uso experimental posterior.

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Atributos de los productos básicos

Introducción de productos básicos

Fuente del género: personas

Sexo y edad: hombres, edad desconocida

Características de crecimiento: crecimiento suspendido

Morfología celular: linfoblastoide

Especificaciones celulares:1 x 106 células/T25o1 ml de aguaCriodepósito

Condiciones de cultivo:RPMI-1640 + suero bovino fetal al 10% (FBS)37℃5% de CO2

Condiciones de congelación:90% de FBS + 10% de DMSO

Método de transmisión:1:4a1:10De generación en generación,1 - 2Transmisión celestial1generación

Pasos de la operación de cultivo celular:

(1) cuando la morfología celular y la densidad de crecimiento bajo el microscopio alcanzan el 90%, se realiza la transmisión.

(2) aspirar y abandonar el medio de cultivo. Añadir PBS para limpiar 1 o 2 veces y Sacudirlo bien y descartarlo.

(3) añadir la cantidad que cubre el Fondo de la botella y contiene edta.

(4) el frasco de cultivo se coloca en una caja de cultivo a 37 ° C para su digestión, se saca alrededor de 3 minutos, se observa con un microscopio si la cantidad de células supera el 80%, se produce una contracción y un espacio celular más grande. Golpee suavemente el frasco de cultivo para que las células restantes se desprendan, agregue el doble de la cantidad para suspender la digestión y sople uniformemente para evitar la digestión excesiva.

(5) la suspensión celular se absorbe en un tubo centrífuga y se centrifuga a 1000 RPM / MIN durante 3 a 5 minutos.

(6) retire el sobrenadante, agregue el medio de cultivo para volver a suspender las células y sople las células para que se dispersen uniformemente.

(7) aspirar la suspensión celular, seleccionar la densidad adecuada para vacunarse en el nuevo frasco de cultivo, complementar el medio de cultivo y Sacudirlo bien, y colocar una incubadora de CO2 a 37 ° C para el cultivo.

(8) determinar el tiempo de cambio o paso de acuerdo con el Estado de crecimiento celular.

(9) Criopreservación celular

Tratamiento después de la recepción celular:

1) después de recibir la célula, el 75% de la pared de la botella de desinfección con alcohol coloca la botella t25 en una incubadora de 37 ° C durante aproximadamente 2 - 3 horas. si se encuentra que la botella de cultivo está rota, hay un derrame de líquido y la célula está contaminada, Póngase en contacto con nosotros a tiempo después de tomar una foto.

2) confirme el Estado de la célula bajo un microscopio 4 o 5x, mientras toma una foto de la célula recién recibida (10 × 20 × cada una) y una foto de la apariencia del frasco de cultivo como base para el Estado de la célula en el momento de la recepción después de la venta.

3) células adheridas: las células se colocan en una incubadora a 37 ° C durante 2 - 3h para observar el crecimiento y la adherencia de las células bajo un microscopio, y algunas células adheridas se desprenden y se agrupan debido a la vibración durante el transporte expreso. Si se observa la densidad de crecimiento de las células bajo el microscopio por debajo del 60%, se puede eliminar el medio de cultivo de infusión en el frasco de cultivo (si hay células no adheridas que necesitan recuperación centrífuga, se suspende en el frasco de cultivo original), se añade el medio de cultivo recién preparado de 6 - 8 ML y se coloca En una caja de cultivo celular para continuar el cultivo. Si la densidad de crecimiento celular alcanza más del 70% - 80%, la célula puede ser tratada de generación en generación. Durante el proceso de transmisión, si las células que se desprenden debido al transporte de vibraciones necesitan ser recicladas por centrifugación.

Productos que la compañía está vendiendo:

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CSF1RReorganizadorReceptor CSF1R / MCSF / CD115ProteínaSu & FcetiquetaProteína

Proteína HA H5N1Gripe a recombinanteH5N1 (A/duck/Hunan/795/2002)HemaglutininaHA1 (Hemaglutinina)Proteína

NAPAReorganizadorNAPA / alfa-SNAPProteínaProteína

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Mira, Sr. awasthi...Antineutrófico de rata/.Anticuerpos centrosomáticos

Una placa resistente al recubrimiento(recubrimiento)Amortiguador100mililitro

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SU-DHL-16Células de linfoma humanoKit de detección de marcadores de cáncer de ratón Kit de marcador de cáncer de ratón Modelo y especificaciones:96T / 48T Kit de marcador de cáncer de ratón, modelo de especificación:96T / 48TFuente: kit de prueba (embalaje importado), alias del producto: kit de marcador de cáncer de ratón, kit de prueba de marcador de cáncer de ratón Condiciones de conservación:2 - 8℃ Vida útil:6Meses.

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