Células epiteliales cervicales de rata

Perfil de la célula:

El cuello se encuentra en la parte inferior, aproximadamente un cono, largo 2.5-.3 cmEl extremo superior está conectado con el cuerpo y el extremo inferior es profundo. El tamaño del cuello uterino y la proporción del cuerpo uterino cambian con la edad y el Estado.

La pared cervical está compuesta por la mucosa, la capa muscular y la membrana externa. Entre ellos, la capa mucosa se compone principalmente de células epiteliales mucosas.

Características celulares:

1(...) Las células provienen de tejidos normales de animales de laboratorio.

2)Identificación celular:PCKLa Tinción fluorescente fue positiva.

3)Las células identificadas tienen una pureza superior90%.

4)No contieneEl VIH-1, VHB,VHC, micoplasma, levadura Y.

5)Modo de crecimiento celular: piedra pavimentada, células poliángulos, cultivo pegado a la pared.

Medios de cultivo recomendados:

Recomendamos usarDelfoGeneración original Epitelio Sistema de cultivo celular Como reactivo de cultivo de la célula.

Informe experimental:

I. aislamiento y cultivo:

1. en condiciones estériles, se extrae el tejido auricular de las ratas de SD de 1 - 3 días de edad, y luego se limpia este bloque de tejido dos veces con PBS para cortar el tejido en aproximadamente 1 mm3;

2. añadir 4 ml de líquido digestivo enzimático (0,1% y 0,1% colagenasa tipo i) al bloque de tejido, suspender durante 10 segundos, digerir a 37 ° C durante 10 minutos, luego soplar con un gotero para hacer una suspensión unicelular, precipitar y recoger el suero naturalmente, y colocar a 4 ° C después de terminar la digestión con un medio de cultivo FBS que contiene 10%;

3. añadir 3 a 4 ml de líquido digestivo enzimático al tejido restante, suspender durante 10 segundos, digerir a 37 ° C durante 10 minutos, recoger el suero superior de acuerdo con el método anterior y terminar la digestión y colocarlo a 4 ° c. repetir este paso 2 - 3 veces hasta que el tejido sea digerido;

4. filtrar el líquido digestivo celular con un tamiz de acero inoxidable de 200 mallas, centrifugar 1200r / MIN durante 10 minutos, descartar el sobrenadante, precipitar las células con suspensión de medio de cultivo que contiene 10% FBS dmem / f12, inocular en un frasco de cultivo de 25 cm 2, colocarlas a 37 ° C y cultivarlas en una incubadora de CO2 al 5%;

5. después de pegar la pared a una velocidad diferencial durante 1 hora, se succiona el medio de cultivo y se inocula en una placa de 6 agujeros para continuar el cultivo de acuerdo con las necesidades del experimento;2. identificación por inmunofluorescencia:

1. cuando los miocitos auriculares crezcan hasta el 80% de fusión, abandone el medio de cultivo, lave las células 2 veces con PBS cultivados a temperatura ambiente, 10 minutos cada vez, y luego fije las células a temperatura ambiente durante 15 minutos con poliformaldehído al 4%;

2. el PBS enjuaga las células dos veces, 10 minutos cada vez, y luego penetra la película con un 0,1% de Tritón X - 100 a 4 ° C durante 15 minutos;

3. el PBS enjuaga las células dos veces, 10 minutos cada vez, y luego cierra las células con un 4% de BSA durante 30 minutos a temperatura ambiente;

4. diluir alfa - Acción un anticuerpo en una proporción de 1: 100, y luego colocarlo en un refrigerador a 4 ° C para incubar células durante la noche;

5. el PBS enjuaga las células tres veces, 10 minutos cada vez, diluye la resistencia secundaria a la alfa - Acción en una proporción de 1: 150 y las coloca durante 1 hora a 37 ° c;

6. enjuagar con PBS 3 veces, 10 minutos cada vez, observar la imagen bajo un microscopio fluorescente invertido y tomar fotos.

Productos que la compañía está vendiendo:

Proteína del marco de la cabeza del tenedor de rataP3 (FoxP3)Kit de prueba, nombre en inglés:Kit de ELISA FoxP3

Kit de ELISA de fenilalanina amoníaca liasa (PAL) de ratón LRatonesLBenzilasa(PAL)Kit de detección

ELISALeucocitos de ratón-Factor estimulante de colonias de macrófagos(ratón GM-CSF) Embalaje importado

Cliakitforldh (lactato deshidrogenasa humana) Kit ElisaLactato deshidrogenasa humana

Tipo universalN-Acetiltransferasa(NAT)Cromatografía líquida activa de alto rendimiento(HPLC)Kit de detección cuantitativa20vez

Elisakiven -Interferón gamma mono gamma

CDH13Ratas recombinantesCDH13 / Cadherina-13 / H CadherinaProteínaProteína

DAD1 (receptor de dopamina D1)Receptores de dopaminaD1Antígenos

IL16ReorganizadorIL16 / Interleucina-16ProteínaProteína

ENTPD3 Proteína humanaReorganizadorENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3Proteína

Ratón de proteína CRatones recombinantesC / SLAMF2 / BCM1Proteína

DAD1 (receptor de dopamina D1)Receptores de dopaminaD1Antígenos

ENTPD3 Proteína humanaReorganizadorENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3Proteína

CDH13Ratas recombinantesCDH13 / Cadherina-13 / H CadherinaProteínaProteína

Ratón de proteína CRatones recombinantesC / SLAMF2 / BCM1Proteína

IL16ReorganizadorIL16 / Interleucina-16ProteínaProteína

Globulina fetal de clase a de ratón/.Proteína alfa - fetal(AFP) ELISAKit96T / 48T

Activador del receptor soluble en rata del ligando del factor nuclear kappa B (sRANKL) Kit de ELISAFactor nuclear soluble Kappa en ratasC. B.Ligando del factor de activación del receptor(sRANKL)Kit de detección

Gen activador de combinación de huma1, RAG-1ELISAKitGen de activación recombinante humana1 (RAG-1)Kit de detección96T / 48TEmbalaje importado

Cuerpo celular parietal de gas humano, AGPA/PCAKit de detección de anticuerpos humanos contra la proteína dura de la red(ara)Especificaciones del kit de prueba:96T / 48T

Planta Lai(lisina)Kit de detección cuantitativa por colorimetría química de contenido20vez

HumanoVitamina B6,VB6ELISAKitpersonaB6 (VB6)Especificaciones del kit de prueba:96T / 48T

Células epiteliales cervicales de rataComponentes del complemento de ratón5 Nombre en inglés: Complejo del ratón Compone 5 Especificaciones: Siglas en inglés: C5

Factor de crecimiento del tejido conjuntivo de ratón Nombre en inglés: Factor de crecimiento del tejido conectivo del ratón Especificaciones: Siglas en inglés: CTGF

Corteza de ratón Nombre en inglés: Coicosterona del ratón Especificaciones: Siglas en inglés: CO

Creatinina de ratón Nombre en inglés: Creatinina del ratón Especificaciones: Siglas en inglés: CT

Precauciones:

1. después de recibir la célula, primero observe si la botella celular está intacta, si el medio de cultivo tiene fugas, turbidez y otros fenómenos, si hay los fenómenos anteriores, Póngase en contacto con nosotros a tiempo.

2. lea cuidadosamente las instrucciones de la célula para comprender la información relacionada con la célula, como la morfología celular, el medio de cultivo utilizado, la proporción de suero, las citocinas necesarias, etc., para asegurarse de que las condiciones de cultivo celular sean consistentes, y si las condiciones de cultivo son inconsistentes y causan problemas con la célula, la responsabilidad recae en el cliente.

3. limpie la superficie del vial celular con un 75% de alcohol y observe el Estado celular bajo un microscopio. Debido a problemas de transporte, es normal que algunas células formen fragmentos debido a cambios de temperatura y accidentes violentos. Después de observar el Estado celular, el 75% de la pared del vial de desinfección con alcohol colocó el vial t25 en una incubadora a 37 ° C durante 4 - 6 horas.

4. las células adherentes se pueden digerir, las células suspendidas se mezclan directamente para recoger las células, 900 RPM - 1000 RPM se centrifugan durante 3 minutos y se abandonan el sobrenadante. Añadir 5 ml de células de suspensión pesada pbs, luego centrifugar 900 RPM - 1000 RPM durante 3 minutos, suspender las células con un medio fresco * de cultivo y vacunarlas en un nuevo frasco o placa de petri, colocarlas en una incubadora para su cultivo.

5. se pide a los clientes que utilicen medios de cultivo en las mismas condiciones para el cultivo celular.

6. se recomienda que los clientes tomen varias fotos de las células tres días antes de recibir las células para registrar el Estado de las células y facilitar la comunicación con nuestro Departamento técnico. Debido al transporte, las células sensibles individuales experimentarán inestabilidad, por favor póngase en contacto con nosotros a tiempo para informarnos de la situación específica de las células, para que nuestros técnicos puedan rastrear la visita de regreso hasta que se resuelva el problema.

7. la célula es solo para uso científico.

8. nota: el medio de cultivo utilizado para el transporte (medio de cultivo de infusión) ya no se puede utilizar para cultivar células, por favor, cambie por un medio de cultivo * recién preparado de acuerdo con las condiciones de cultivo celular de las instrucciones para cultivar células. Después de recibir la recomendación de transmisión celular, se recomienda la transmisión 1: 2.

9. nota: la transmisión de 1: 2 es una botella t25, dos botellas t25 o dos placas de Petri de 6 cm. No una botella t25 pasa por dos placas de Petri de 10 cm.