Rk - 13 (línea de células renales de conejo)

Tratamiento celular:

1) recuperación de células congeladas:

El criodepósito que contiene 1 ml de suspensión celular se sacude rápidamente y se descongela en un baño de agua a 37 ° c, y se mezcla uniformemente en el tubo centrífuga que contiene un medio de cultivo de 4 - 6 ML. Centrifugar durante 3 - 5 min a 1000 rpm, descartar el sobrenadante y suspender las células en el medio de cultivo. A continuación, la suspensión celular se agregó al frasco de cultivo (o placa de petri) que contenía 6 - 8 ml de medio de cultivo para cultivar a 37 ° C durante la noche. Al día siguiente, se observó el crecimiento celular y la densidad celular bajo el microscopio.

2) transmisión celular: si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede realizar el cultivo de transmisión.

Para la transmisión de células adherentes, se pueden consultar los siguientes métodos:

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 0,25% (w / v) - 0,53 mm EDTA al frasco de cultivo (t25 1 - 2 ml, T75 2 - 3 ml), colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir durante 1 - 2 minutos (las células difíciles de digerir pueden prolongar adecuadamente el tiempo de digestión), y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, si la mayoría de Las células se redondean y se desprenden, llevarlo rápidamente de vuelta a la Mesa de operaciones y añadir 3 - 4 ml de medio de cultivo con un 10% de FBS después de golpear ligeramente el frasco para terminar la digestión.

3. mezclar suavemente y aspirar, centrifugar durante 3 - 5 min a 1000 rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien. Dividir la suspensión celular en un nuevo vial t25 en una proporción de 1: 2, añadir 6 - 8 ml de un nuevo medio de cultivo configurado de acuerdo con los requisitos de las instrucciones para mantener la vitalidad del crecimiento celular, y la transmisión posterior se realiza en una proporción de 1: 2 a 1: 5 de acuerdo con la situación real.

3) Criopreservación celular: después de recibir la célula, se recomienda congelar un lote de semillas celulares durante las tres primeras generaciones de cultivo para su uso experimental posterior.

Rk - 13 (línea de células renales de conejo)

Atributos de los productos básicos

Introducción de productos básicos

Edad (sexo) 5 semanas

Fuentes organizativas riñón

Características de crecimiento Células adherentes

Morfología celular Tipo de célula epitelial

Nivel de bioseguridad 2

Medio de crecimiento MEM + 10% FBS + 1% P / S

Proporción de descendientes recomendados 1: 2 - 1: 4

Frecuencia recomendada de cambio de líquido 2 a 3 veces / semana

Condiciones de congelación

Liofilizado:55% medio básico + 40% FBS + 5% Dmso

Temperatura: nitrógeno líquido

Condiciones de cultivo

Fase gaseosa: aire,95%； CO2, 5%

Temperatura:37℃

Pasos de la operación de cultivo celular:

(1) cuando la morfología celular y la densidad de crecimiento bajo el microscopio alcanzan el 90%, se realiza la transmisión.

(2) aspirar y abandonar el medio de cultivo. Añadir PBS para limpiar 1 o 2 veces y Sacudirlo bien y descartarlo.

(3) añadir la cantidad que cubre el Fondo de la botella y contiene edta.

(4) el frasco de cultivo se coloca en una caja de cultivo a 37 ° C para su digestión, se saca alrededor de 3 minutos, se observa con un microscopio si la cantidad de células supera el 80%, se produce una contracción y un espacio celular más grande. Golpee suavemente el frasco de cultivo para que las células restantes se desprendan, agregue el doble de la cantidad para suspender la digestión y sople uniformemente para evitar la digestión excesiva.

(5) la suspensión celular se absorbe en un tubo centrífuga y se centrifuga a 1000 RPM / MIN durante 3 a 5 minutos.

(6) retire el sobrenadante, agregue el medio de cultivo para volver a suspender las células y sople las células para que se dispersen uniformemente.

(7) aspirar la suspensión celular, seleccionar la densidad adecuada para vacunarse en el nuevo frasco de cultivo, complementar el medio de cultivo y Sacudirlo bien, y colocar una incubadora de CO2 a 37 ° C para el cultivo.

(8) determinar el tiempo de cambio o paso de acuerdo con el Estado de crecimiento celular.

(9) Criopreservación celular

Tratamiento después de la recepción celular:

1) después de recibir la célula, el 75% de la pared de la botella de desinfección con alcohol coloca la botella t25 en una incubadora de 37 ° C durante aproximadamente 2 - 3 horas. si se encuentra que la botella de cultivo está rota, hay un derrame de líquido y la célula está contaminada, Póngase en contacto con nosotros a tiempo después de tomar una foto.

2) confirme el Estado de la célula bajo un microscopio 4 o 5x, mientras toma una foto de la célula recién recibida (10 × 20 × cada una) y una foto de la apariencia del frasco de cultivo como base para el Estado de la célula en el momento de la recepción después de la venta.

3) células adheridas: las células se colocan en una incubadora a 37 ° C durante 2 - 3h para observar el crecimiento y la adherencia de las células bajo un microscopio, y algunas células adheridas se desprenden y se agrupan debido a la vibración durante el transporte expreso. Si se observa la densidad de crecimiento de las células bajo el microscopio por debajo del 60%, se puede eliminar el medio de cultivo de infusión en el frasco de cultivo (si hay células no adheridas que necesitan recuperación centrífuga, se suspende en el frasco de cultivo original), se añade el medio de cultivo recién preparado de 6 - 8 ML y se coloca En una caja de cultivo celular para continuar el cultivo. Si la densidad de crecimiento celular alcanza más del 70% - 80%, la célula puede ser tratada de generación en generación. Durante el proceso de transmisión, si las células que se desprenden debido al transporte de vibraciones necesitan ser recicladas por centrifugación.

Productos que la compañía está vendiendo:

Factor Trébol de rataKit de prueba 2 (tff2), nombre en inglés: tff2 Elisa kit

Mouse signal ansduction modele 7 (smad7) kit de detección de la molécula de señalización de ratón Kit 7 (smad7)

Ratcarbonicanhydrase, kit de detección de enzima de rata caelisakit (ca) 96t / 48t empaquetado importado

Laikitforhaase (humanhyaluronidase) elisakit hialuronidasa humana

Caspasa celular- 8 (caspace - 8) kit de detección cuantitativa colorimétrica activa 20 veces

Ratvascuola celladesionmolecule1, vcam - 1 elisakit rata molécula de adhesión de células endoteliales vasculares 1 (vcam - 1 / cd106) especificación del kit de prueba: 96t / 48t

Fzd10 ratón recombinante frizzled - 10 / fzd10 proteína (etiqueta fc) (etiqueta fc) proteína

Receptor de Ang II (receptor de Ang II 0,5 mg de Ang ii) receptor de Ang II (antígeno)

Tek proteína humana recombinante tie2 / cd202b / Tek (etiqueta his & gst) Protein

Proteína csnk1g2 humana recombinante csnk1g2

Proteína il20rb recombinante de rata il20rb (etiqueta fc)

Inhibidores de la CaspasaProteína recombinante 3 (cst3) reconbinant cistitina 3 (cst3)

Proteína csnk1g2 humana recombinante csnk1g2

Ratón recombinante cst6 cistitina E / cst6 proteína Protein

Proteína klrc1 Protein Cynomolgus mono cangrejo recombinante nkg2a / nkg2 / cd159a / klrc1 (etiqueta fc)

Csnk2a2 proteína humana recombinante csnk2a2 / ck2a2 Protein

RK-13 (Línea de células renales de conejo(...)Anticomponente de ratón(tat) kit de Elisa 96t / 48t

Kit de detección de hormona paratiroidea (pth) de rata Kit Elisa Rat

Kit de detección de la proteína de transferencia de glucosa humana 1 (gl1) gl1elisakit 96t / 48t empaquetado importado

Kit de detección humana 2,3 - disphospiglicerate, 2,3 - DPG kit de detección humana 2,3 - di0 ácido glicirrínico (2,3 - dpg) especificación del kit de detección: 96t / 48t

Hongos/ kit de aislamiento de ARN total de células de levadura 20 veces

Mousepatrotein b100, apo - b100elisakit ratón Apolipoproteína b100 (apo - b100) especificación del kit de prueba: 96t / 48t

Soluble en ratonesAcción de la P - selectina (mouse SP - selectin / scd62p): especificaciones de elisa: empaquetado importado

RatonesAcción de la sustancia P (mouse sustance p): especificaciones de elisa: empaquetado importado

Proltonina de ratón(mouse prl) acción: especificaciones de elisa: embalaje importado

Embarazo de ratón(mouse prog) acción: especificaciones de elisa: empaquetado importado