Ratones moc1 / moc2

Nombre de la célula: Ratones moc1 / moc2Carcinoma de células escamosas orales

Línea celular:C57BL/6 Cxcr3-/-

Fuente celular:Países extranjeros

Identificación celular:Se ha aprobado la identificación Str

Morfología celular:Tipo de célula poliédrica linfoblástica, pared adherente + crecimiento suspendido

Medios de cultivo:Dmem (incluido NaHCO3 1,5g / l) (basmed - AW - 013) + FBS 10% + P / s1% 500ml.

Condiciones de cultivo: aire en fase gaseosa, 95%; Dióxido de carbono, 5%. Temperatura: 37 grados centígrados, humedad de la incubadora 70% - 80%

Antecedentes celulares:El cáncer de células escamosas orales (oscc) es un subconjunto destacado del cáncer de cabeza y cuello. el principal factor de riesgo para la aparición de oscc es la exposición a carcinógenos, que distingue este subgrupo del cáncer de cabeza y cuello del cáncer de cabeza y cuello inducido por el virus del cáncer humano. Pero el pronóstico del oscc se ha mantenido estable durante décadas, lo que ha provocado un aumento de la incidencia y la mortalidad.

Uso celular:Solo para investigación científica

Precauciones

1. Las células moc1 son particularmente activas, la tasa de valor agregado es muy rápida, no se recomienda que la densidad de transmisión sea demasiado alta, sino que se opta por una litera más delgada, cuando se alcanza alrededor del 80% de la transmisión, es difícil de digerir, colocarlas en una incubadora para la digestión, y la duración es de unos 3 - 4 minutos Después de sacarlas.

2. Las células moc2 no son particularmente sólidas como las células convencionales. El ciclo de duplicación no es tan rápido como moc1. Se trata con métodos digestivos convencionales.

3.Las palmaditas se realizan en el lado del utensilio de cultivo para ayudar a las células a desprenderse. el proceso de palmaditas dura unos 2 minutos antes de que la mayoría de las células se desprendan. si la proporción de desprendimientos no es grande, también se puede volver a poner en la incubadora para seguir digiriendo durante 1 - 2 minutos y luego sacarlas de nuevo para palmaditas y desprendimientos. después de que el 80 - 90% de las células se desprendan, se termina la digestión, se suspende por centrifugación y luego se vuelve a colocar el frasco, disperso

Envío a temperatura ambiente

recibidoDespués de 2 - 3 horas de desinfección y colocación de la incubadora en la incubadora, se observan la densidad y el estado, se toman 2 - 3 fotos de retroalimentación a las ventas, y la densidad se puede transmitir de generación en generación. La proporción de transmisión temprana es de 1: 2. cuando se transmita de nuevo después de crecer, se recomienda congelar una de las botellas enteras en un tubo de almacenamiento congelado de 1 ml, y la otra botella continúa transmitiéndose. después de congelar repetidamente 2 - 3, se ampliará para hacer experimentos para evitar que las emergencias causen la interrupción de las semillas.

Envío de hielo seco

Criodepósito de envío celular convencionalDos, uno para la recuperación, el otro para la reserva, cuando la recuperación no tiene éxito, se recupera estrictamente de acuerdo con los requisitos del fabricante, ninguno de los cuales tiene éxito en la recuperación, conservando inmediatamente fotos de recuperación para informarnos.

Células adherentes

1. Abandonar el sobrenadante de cultivo y usar iones de calcio y magnesio libresPBS humedece las células 1 - 2 veces.

2. Unirse0,25% (w / v) botellas T75 de 2 - 3 ml), digeridas en una incubadora a 37 ° C durante 1 - 2 minutos (las células difíciles de digerir pueden prolongar adecuadamente el tiempo de digestión,

A continuación, se observa la digestión de la célula bajo el microscopio, si la mayoría de la célula se redondea y se cae, se devuelve rápidamente a la Mesa de operaciones, se golpea suavemente el frasco de cultivo y se agrega3 - 4ml de medio con un 10% de FBS para terminar la digestión.

３. Después de mezclar suavemente, aspirar, enCentrifugar durante 3 - 5 min a 1000 rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplarlo bien. La suspensión celular se dividió en una nueva placa de Petri t25 / 6 cm en una proporción de 1: 2, y la transmisión posterior se llevó a cabo en una proporción de 1: 2 a 1: 5 de acuerdo con la situación real.

4. Criopreservación celular: después de recibir la célula, se recomienda congelar un lote de semillas celulares durante las tres primeras generaciones de cultivo para su uso experimental posterior.

５. Medios de cultivo para el transporte(medio de cultivo de infusión) ya no se puede utilizar para cultivar células, por favor, cambie por un medio de cultivo recién preparado de acuerdo con las condiciones de cultivo celular de las instrucciones para cultivar células.

Células suspendidas

Las células que crecen en suspensión pueden mantener el Estado de crecimiento de las células añadiendo un medio de cultivo al frasco de cultivo, y en general la densidad celular se mantiene en1 × 10 a 1 × 10 / ML (diferentes células requieren diferentes densidades) puede mantener el crecimiento normal de las células. Si es necesario dividir el vial, se puede recoger la suspensión celular en un tubo centrífuga de 1000 rpm, centrifugar durante 5 minutos, descartar el sobrenadante, reponer 1 - 2 ml de medio de cultivo y volver a mezclar, y luego dividir la suspensión celular en el nuevo vial t25 en una proporción de 1: 2, añadir 6 - 8 ml de nuevo medio de cultivo configurado de acuerdo con los requisitos de las instrucciones para mantener la vitalidad de crecimiento celular, y la transmisión posterior se lleva a cabo en una proporción de 1: 2 a 1: 4 de acuerdo con la situación real.

Bioseguridad

1. Todas las células animales se consideran potencialmente dañinas para la biología y deben operar en una plataforma de bioseguridad secundaria. preste atención a la protección. todos los residuos líquidos y utensilios que han estado en contacto con esta célula deben ser esterilizados antes de que puedan ser desechados.

2. Se recomienda usar siempre guantes protectores, ropa y máscaras protectoras al reanimar las células congeladas. Nota: el congelador Se filtrará cuando se sumerja en nitrógeno líquido y se llenará lentamente de nitrógeno líquido. Al descongelarse, la conversión del nitrógeno líquido en fase gaseosa puede provocar la explosión del recipiente o soplar su tapa con fuerzas peligrosas, produciendo así escombros voladores que causan daños humanos.