Hep - 53.4 células de cáncer de hígado de ratón

Nombre de la célula:Hep - 53.4 células de cáncer de hígado de ratón

Alias de la célula:HEP-53.4 ; 53,4; Células de cáncer de hígado de ratón

Fuente celular:Alemania

Identificación celular:Se ha aprobado la identificación Str

Morfología celular:Células similares a la epidermis, crecimiento pegado a la pared

Medios de cultivo:Dmem (incluido NaHCO3 1,5g / l) (basmed - AW - 013) + FBS 10% + P / s1%

Condiciones de cultivo:Aire en fase gaseosa, 95%; Dióxido de carbono, 5%. Temperatura: 37 grados centígrados, humedad de la incubadora 70% - 80%

Condiciones de congelación:Criopreservación sin suero, almacenamiento de nitrógeno líquido

Antecedentes celulares:Derivados del carcinoma hepatocelular primario en ratones c57bl / 6j, que representan fielmente el carcinoma hepatocelular y proporcionan modelos valiosos para el estudio de este tipo de cáncer de hígado, sinónimos de hep - 53.4 y 53.4, que facilitan la identificación y la cita cruzada, el carcinoma hepatocelular es un gran problema de salud que permite un estudio preciso de sus vías moleculares, interacciones celulares y estrategias terapéuticas, células originarias de musculus (ratones) que proporcionan un sistema de modelos relevante para entender y desarrollar tratamientos para el carcinoma hepatocelular.

Uso celular:Solo para investigación científica

Período de carga celular:Al contado, alrededor de una semana

Asuntos celulares

Envío a temperatura ambiente

recibidoDespués de 2 - 3 horas de desinfección y colocación de la incubadora en la incubadora, se observan la densidad y el estado, se toman 2 - 3 fotos de retroalimentación a las ventas, y la densidad se puede transmitir de generación en generación. La proporción de transmisión temprana es de 1: 2. cuando se transmita de nuevo después de crecer, se recomienda congelar una de las botellas enteras en un tubo de almacenamiento congelado de 1 ml, y la otra botella continúa transmitiéndose. después de congelar repetidamente 2 - 3, se ampliará para hacer experimentos para evitar que las emergencias causen la interrupción de las semillas.

Envío de hielo seco

Criodepósito de envío celular convencionalDos, uno para la recuperación y el otro para la reserva, la Primera recuperación no tuvo éxito, la segunda recuperación se reanudó estrictamente de acuerdo con los requisitos del fabricante, ninguno de los cuales tuvo éxito en la recuperación, conservamos inmediatamente fotos de recuperación para informarnos.

Precauciones

1. La digestión convencional recoge la centrifugación celular.

2.Después de la centrifugación, retire el líquido superior del tubo centrífuga y agregue 1 ml de células de suspensión pesada para mezclar bien. se recomienda sacudir suavemente o soplar suavemente las células, colocarlas en una incubadora para digerir las células y luego digerirlas durante aproximadamente 1 minuto.

3. Después de la digestión, sople suavemente la suspensión celular con una pistola de pipeta para dispersar la masa celular y agregue rápidamente 3 - 5 ml de medio de cultivo que contiene suero para mezclar bien para terminar la digestión.

5.Bajo el microscopio, se observa si las células se convierten en células individuales uniformes y dispersas. si hay una pequeña cantidad de pequeñas masas celulares formadas en grupos, no es necesario volver a digerir, de modo que después de adherirse a la pared, las células se disipan después de que el crecimiento celular se estabilice.

4. Agregue alrededor de 5 ml del medio de cultivo correspondiente de la célula y mezcle bien, y conecte el frasco de cultivo / placa de Petri proporcionalmente.

Células adherentes

1. Abandonar el sobrenadante de cultivo y usar iones de calcio y magnesio libresPBS humedece las células 1 - 2 veces.

2. UnirseEl 0,25% (w / v) EDTA se digiere en un matraz de cultivo (t25 1 - 2 ml, T75 2 - 3 ml), se coloca en una incubadora a 37 ° C durante 1 - 2 minutos (las células difíciles de digerir pueden prolongar adecuadamente el tiempo de digestión), y luego se observa la digestión celular bajo un microscopio, si la mayoría de las células se redondean y se desprenden, se devuelve rápidamente a la Mesa de operaciones, se golpea ligeramente el matraz de cultivo y se añade 3 - 4 ml de medio de cultivo con un 10% de FBS para terminar la digestión.

Atención especial

La célula creció bien en el medio de cultivo dmem (que contiene 1,5g / lnahcho3), y la mayoría de los dmem contienen másAlta concentración de NaHCO3 (3,7g / l), si se cultiva bien con el medio de cultivo dmem (3,7g / L nahco3)Las células necesitan aumentar la concentración de CO2 (7% - 10%)