Medio de cultivo polimérico de D - lisina (peso molecular: 15 - 300000)

Poli-D-lisina (Mw 150.000-300.000)

Polipolid - lisina (peso molecular: 15 - 300000)

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Palabras clave de búsqueda:

Poly - L - lisina (poly - L - lisina, pll); Poly - D - lisina (poly - D - lisina, pdl); Gelatina gelatin; Colagen tipo I colágeno tipo I tipo i; Fibronectina; Pegamento de matriz matricel; CAS：27964-99-4；

Información del producto:

Introducción básica:

La polylisina es un polímero de aminoácidos con carga positiva, capaz de unirse al adn, a la membrana de los glóbulos rojos o a cualquier proteína con carga negativa, una factor de adhesión celular no específica que promueve la adsorción celular en una matriz sólida. El mecanismo de acción es que puede aumentar la interacción estática entre iones de carga negativa en la superficie de la membrana celular y la superficie de la matriz sólida (como placas de Petri celulares, portadoras de vidrio, etc.). Cuando se adsorbe en la superficie del cultivo, la polylisina aumenta el número de sitios de Unión catiónica utilizados para la Unión celular. El tamaño del peso molecular de la polylisina está relacionado con la viscosidad, es decir, el peso molecular es bajo y la viscosidad es baja, cuanto más fácil es usarlo; El peso molecular es alto, la viscosidad es alta y se proporcionan más sitios de adhesión. La polylisina con un peso molecular superior a 30.000 es adecuada para promover la adhesión celular a sustratos sólidos.

Hay dos subtipos comunes de Poly - lisina, D - y L - tipo. Debido a que la polylisina es una factor de adhesión no específica a la Unión celular, ambos subtipos se pueden utilizar como sustratos sólidos envueltos, lo que puede promover el crecimiento de las células adheridas a la pared en el cultivo celular. Se informa que la L - lisina polimérico puede mejorar la adherencia de la proteína en la placa de cultivo de elisa. Sin embargo, en las aplicaciones celulares, algunas células son capaces de hidrolizar la L - lisina polimérica. En este caso, la polid - lisina debe usarse como factor de adhesión para proteger las células de la destrucción por la ingesta excesiva de l - lisina.

Este producto es Poly - D - lisina, con un peso molecular de 150.000 - 300.000, adecuado para el cultivo celular. Como matriz de cultivo celular, el uso recomendado es: para placas de cultivo de 25 cm 2, se necesita una solución de polylisina de 0,1 mg / ml de aproximadamente 0,5 ml - 1,0 ML. Este producto también se puede utilizar como tableta pegajosa en el análisis histológico.

Métodos de conservación y transporte

Conservación: - conservación seca a 20 ° c, estable durante 3 años.

Transporte: transporte de bolsas de Hielo.

Precauciones

1. en algunas aplicaciones de cultivo celular, algunas células digieren y absorben la L - lisina polimérica, y la ingesta excesiva de l - lisina polimérica produce cierta citotoxicidad. Por lo tanto, en este caso se recomienda la selección de polipolidimetild - lisina (poly - D - lisina), como Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000)（#MX0922）。

2. este producto se proporciona en forma de ácido bromhídrico (hbr). si desea eliminar el ácido bromhídrico de este producto, puede disolverlo en un amortiguador neutro y diálisis para eliminar los iones de sal.

3. para su seguridad y salud, Use ropa experimental y guantes desechables.

Modo de empleo

1. preparación del líquido de almacenamiento

Después de disolver completamente 10 mg de polvo en 2 ml de agua desionizada estéril y filtrar la esterilización con una membrana filtrante de adsorción de bajo contenido de proteínas de 0,2 micras, se obtiene un líquido de almacenamiento Poly - D - lisina de 5 mg / ml, que se puede utilizar directamente para el cultivo celular. Para mantener la contaminación causada por el uso múltiple, el líquido de almacenamiento se puede dividir en un tubo estéril en un solo uso, conservar a 4 ° c o - 20 ° c, válido durante al menos un año.

2. sustratos recubiertos para cultivo celular

El uso de polid - lisina para experimentos de encapsulamiento relacionados con células requiere la optimización de las condiciones de encapsulamiento de acuerdo con diferentes líneas celulares y aplicaciones. Los pasos generales son los siguientes:
1) diluir el almacenamiento de 5 mg / ml de Poly - D - lisina en la concentración de envoltura del propio sistema experimental de Zui Shi He utilizando agua de grado de cultivo de tejido estéril o pbs. Por lo general, la concentración de la placa de Petri / paquete de placa de uso común es de 0,1 mg / ml, es decir, diluir el líquido de almacenamiento 50 veces antes de usarlo.

2) en condiciones estériles, se envuelve una placa de cultivo celular, con un uso de 0,5 ml - 1,0 ml / 25 cm 2. Agite suavemente la parte inferior de la placa para que cubra toda la superficie de la placa.

3) después de 5 minutos, retire la solución superficial de la placa de cultivo con una pistola y limpie la superficie de la placa con agua de grado de cultivo de tejido estéril o pbs; [nota]: en algunos casos, se necesitan de 1 a 2 horas para completar la pavimentación, y en algunos casos, se necesita pasar la noche pavimentando. Depende de la situación.

4) el Cultivo celular solo se puede realizar después de secar durante al menos 2 horas.

[nota] si la cristalería o las láminas de vidrio después de la cubierta del paquete de polylisina deben ser esterilizadas, se pueden esterilizar con radiación gamma - Ray (en lugar de esterilización a alta presión).

[nota] si la superficie del sobre no es plana, se puede pretratar la lámina de vidrio de 1 mm de acetato de magnesio 2 - 3h, limpiar a través de di antes de comenzar el SOBRE. O, las láminas de vidrio se limpian con ácido (ácido clorhídrico o ácido sulfúrico), después de lo cual el paquete de solución de polylisina se puede aplanar.

3. investigación histológica (edredón de láminas de vidrio)

En general, se recomienda una solución de polisina del 0,1% (w / v) para la preparación de láminas de vidrio histológicas. Después de tratar las láminas de vidrio con la concentración correspondiente de solución de polylisina durante 5 minutos, limpie las láminas de vidrio y sequándolas a temperatura ambiente durante la noche o en un horno a unos 60 ° C durante aproximadamente 1 hora. [nota]: esta solución de trabajo se conserva en una botella de plástico a 4 ° C y limita el número de usos a menos de 4 veces.

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