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Células de cáncer de ovario humano ovtoko

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Categoría de producto
Lugar de origen
Descripción general
Atributos básicos de la célula $r $n nombre de la célula ovtoko células de cáncer de ovario humano $r $n, también conocidas como ovtoko $r $n número de mercancía XY - h1036 $r $n origen de la especie humana $r $n sexo femenino $r $n origen de tejido ovárico $r $n características de crecimiento adhesión a la pared crecimiento de $r $n morfología celular $r $n especificación de células epiteliales 1 ¿ 215; Botella de cultivo 10 × 6cells / t25 o embalaje de tubo de almacenamiento congelado de 1 ml
Detalles del producto
Células de cáncer de ovario humano ovtoko
I. atributos básicos de la célula
Nombre de la célula
Células de cáncer de ovario humano ovtoko
Alias celular
OVTOKO
Número de mercancía
XY -H1036
Fuente de la especie
persona
Edad y sexo
mujer
Fuentes organizativas
Ovarios
Características de crecimiento
Crecimiento pegado a la pared
Morfología celular
Tipo de célula epitelial
Introducción a los antecedentes
-
Nivel de bioseguridad
-
Especificaciones celulares
Botella de cultivo 1 × 10 · 6cells / t25 o embalaje de tubo de almacenamiento congelado de 1 ml
Detección de micoplasma
Nada
Medio de cultivo
RPMI1640 +10% suero bovino fetal
Condiciones de cultivo
Fase gaseosa:95%aire+ 5%Dióxido de carbono; Temperatura:37
Condiciones de congelación
Criopreservación sin suero, almacenamiento de nitrógeno líquido
Tiempo de duplicación
~ 24 - 30hora

II. después de la recepción celularTratamiento
1)Después de recibir la célula, el 75% de la pared de la botella de desinfección con alcohol colocó la botella t25 a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora. si se encuentra que la botella de cultivo está rota, hay derrames de líquido y la célula está contaminada, Póngase en contacto con nosotros a tiempo después de tomar una foto.
2)Confirme el Estado de la célula bajo un microscopio 4 o 5x, mientras toma una foto de la célula recién recibida (10 ×, 20 ×) y una foto de la apariencia del frasco de cultivo como base para el Estado de la célula en el momento de la recepción después de la venta.
3)Células adherentes:Las células se colocan a temperatura ambiente durante 1 hora y se observan bajo un microscopio el crecimiento y la adherencia de las células, algunas de las cuales se desprenden y se agrupan debido a la vibración durante el transporte expreso.Si se observa bajo el microscopio que la densidad de crecimiento de las células es inferior al 60%, se puede eliminar el medio de cultivo de infusión en el frasco de cultivo (si hay células no adheridas que necesitan ser recicladas por centrifugación, se suspende en el frasco de cultivo original), se añade el medio de cultivo completo recién preparado de 6 - 8 ML y se coloca en la Caja de cultivo celular para continuar el cultivo. Si la densidad de crecimiento celular alcanza más del 70% - 80%, la célula puede ser tratada de generación en generación. Durante el proceso de transmisión, si las células que se desprenden debido al transporte de vibraciones necesitan ser recicladas por centrifugación.
4)Método de operación de desprendimiento durante el transporte celular: recoger las células caídas y centrifugarlas, descartarlas y limpiarlas una vez con pbs, descartarlas y limpiarlas centrifugadoras, añadir 1 ml de una enzima en el tubo centrífuga para dispersar y digerir durante unos 20 segundos, añadirPíldorasCompletoDespués de que el medio de cultivo termina la digestión, la centrifugación se repavimenta, y las células adheridas restantes se operan de acuerdo con el método normal de transmisión celular adherida.
5)Nota: el medio de cultivo utilizado para el transporte (medio de cultivo de infusión) ya no se puede utilizar para cultivar células, por favor, cambie por uno recién preparado de acuerdo con las condiciones de cultivo celular de las instrucciones.PíldorasCompletoMedios de cultivo para cultivar células. Se recomienda que el vial de cultivo t25 pase de 1: 2 por primera vez después de recibir la célula.

En tercer lugar,DetalleOperación de cultivo celular
1) Células de reanimación:El siguiente tratamiento de Criopreservación de cultivo celular es solo para referencia, y los pasos de operación específicos se basan principalmente en las instrucciones del producto que lo acompaña.
Contendrá1 ml de aguaEl criotubo de la suspensión celular está en 37Sacudir rápidamente en el baño de agua para descongelar, añadir4 mlEl medio de cultivo se mezcla uniformemente. En1000 rpmCentrifugación en condiciones3 minutos, abandona el líquido limpiador y agrega1-2 mlSopla bien después del medio de cultivo. A continuación, agregue todas las suspensiones celulares al frasco de cultivo que contenga el medio adecuado para cultivar durante la noche (o agregue las suspensiones celulares4 cmEn la placa de petri, agregue aproximadamente4 mlPíldorasCompletoMedio de cultivo, cultivo durante la noche). El tercer día se cambió el líquido y se examinó la densidad celular.
2) transmisión celular:Si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede realizar el cultivo de paso.
a)Abandonar el sobrenadante de cultivo y usar iones de calcio y magnesio libresPBSHumedecer las células1 - 2Veces.
b)más1 ml de aguaLíquido digestivo..0,25% tripsina-0,02% EDTA) en el frasco de cultivo, deje que el líquido digestivo se infiltre en todas las células y coloque el frasco de cultivo en37Digestión en incubadora1 - 3 minutos(dependiendo de la digestión de la célula), luego observar la digestión de la célula bajo el microscopio, si la mayoría de la célula se redondea y se cae, recuperarla rápidamente a la Mesa de operaciones, golpear ligeramente el frasco de cultivo y agregar2-3 mlPíldorasCompletoEl medio de cultivo termina la digestión.
c)Mezcle suavemente y póngalo en un tubo centrífuga estéril.1000 rpmCentrifugadora5 minutosAbandonar el líquido superior y reponer1-2 mlSoplar bien después del medio de cultivo.
d)Presione la suspensión celular1: 2La proporción se divide en nuevos contenidosde 8 mlEn una nueva placa de Petri o botella del medio de cultivo, se cultiva en una incubadora.
Precauciones para la transmisión de células adherentes:
lHay quePBSLávate de nuevo.
lLas células observan varias veces más el tiempo de dominio, no terminan la digestión sin que la célula se desprenda básicamente y luego soplan para que la célula Es más fácil diferenciarse y morir.
lNo siempre soples sobre las células
3) Criopreservación celular:Cuando la célula está en buen estado de crecimiento, se puede congelar la célula. AbajoEl T25 botellas como ejemplo;
a)Recoger células y medios de cultivo celular y cargarlos en un tubo centrífuga estéril,1000 rpmCentrifugación en condiciones4 minutos, abandona el líquido sobrenadante y usaPBSLimpia una vez y abandona.PBS, se realiza el recuento celular.
b)Añadir Criopreservación de células libres de suero en función del número de células hace que la densidad celular sea 1× 10@ 6~ 1 × 10+ 7por mlMezclar suavemente y congelar cada tubo de almacenamiento congelado.1 mlSuspensión celular, preste atención al criodepósito para hacer un buen trabajo de identificación.
c)Coloque el criodepósito en-80Refrigeradores a ° c,24 horasDespués de eso, se transfiere al riego de nitrógeno líquido para su almacenamiento. Registre la ubicación del congelador para recogerlo la próxima vez.
4,Precauciones de formación
1)Problemas con las células y repetición
a)Diversos problemas encontrados durante el transporte celular, pérdida de células, rotura del cuerpo de la botella, fugas graves de líquido de cultivo, etc., se repiten;
b)El problema de la contaminación celular, por favor, nos presente los resultados reales del experimento dentro de los 3 días siguientes a la recepción del producto y vuelva a enviarlo después de la verificación;
c)Después de dos horas de reposo de las células enviadas a temperatura ambiente, dos días después de la reanimación de las células enviadas por congelación de hielo seco, la gran mayoría de las células no sobrevivieron (se necesitan fotos reales y claras del Estado celular) y se reeditaron;
d)Dos días después de la reanimación de las células enviadas por liofilización de hielo seco o a temperatura ambiente, las células enviadas se mantienen estáticas durante 2 horas y no se abren, aparecen contaminantes y se repiten;
e)El problema de la actividad celular, por favor, danos los resultados experimentales reales dentro de los 7 días siguientes a la recepción del producto, identifique la vitalidad celular con el método de Tinción azul de taipan, y tome fotos celulares diarias, que se reeditarán después de la verificación;
f)Las células deben tomar fotos el día de la recepción y los días 2 y 3, y si no se informa durante 3 días, se considerará que el producto está calificado. Si hay un problema dentro de los 4 - 7 días, se debe proporcionar una foto de los 3 días anteriores a la recepción de la célula y una foto del problema de la célula, así como los pasos detallados de las operaciones relacionadas con la célula, y si se comunica con el técnico, el técnico decidirá que somos responsables, se reeditará.
2(...)Situaciones en las que las células tienen problemas y no se repiten
a)Las operaciones del cliente causan contaminación celular y no se repiten;
b)Los errores operativos graves del cliente causan un mal estado celular y no se repiten;
c)El Estado celular causado por el sistema de cultivo celular no recomendado por nosotros no es bueno y no se repite;
d)El Estado celular no es bueno, no se proporcionan fotos reales y claras del Estado celular tres días antes del cultivo, no se reeditan;
e)Si la célula tiene problemas con la célula después de otros tratamientos durante el cultivo celular, no se repetirá;
f)Si el tiempo de comunicación con el personal de servicio al cliente es superior a 7 días después de recibir la célula y encontrar el problema, no se repetirá;
g)Dependiendo de la situación específica
V. precauciones
1. Todas las células animales se consideran potencialmente dañinas para la biología y deben operar en una plataforma de bioseguridad secundaria. preste atención a la protección. todos los residuos líquidos y utensilios que han estado en contacto con esta célula deben ser esterilizados antes de que puedan ser desechados.
2. Se recomienda usar siempre guantes protectores, ropa y máscaras protectoras al reanimar las células congeladas. Nota: el congelador Se filtrará cuando se sumerja en nitrógeno líquido y se llenará lentamente de nitrógeno líquido. Al descongelarse, la conversión del nitrógeno líquido en fase gaseosa puede provocar la explosión del recipiente o soplar su tapa con fuerzas peligrosas, produciendo así escombros voladores que causan daños humanos.
3. ¡¡ la célula es solo para investigación científica! ¡¡ las instrucciones son solo para referencia, sujeto a las instrucciones de llegada reales!