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2843593679@qq.com
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Dirección
Edificio 24, 1661 jialuo highway, Distrito de jiading, Shanghai
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¿¿ qué?Ayuda
¿¿ qué?Shanghai Boke Biotechnology co., Ltd.
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Edificio 24, 1661 jialuo highway, Distrito de jiading, Shanghai
Recordatorio especial: este producto es solo para investigación científica y no se puede utilizar para pruebas clínicas directas en humanos.
Nombre del producto:Método de espectrometría visible de la Caja de prueba de contenido de Coenzima I nad (h)
Especificaciones del producto: 50 tubos / 24 muestras
Método de detección: método de fotometría visible
Número de producto: BK - 01s6322
Clasificación del producto:
Introducción al producto:
| Importancia de la determinación La Coenzima I nad (h) está ampliamente presente en animales, plantas, microorganismos y células cultivadas. nad + es el principal receptor de hidrógeno de la glicólisis (emp) y el ciclo del ácido tricarboxilico (tca). el Nadh resultante entrega los electrones al oxígeno a través de la transmisión de la cadena electrónica respiratoria (etc), formando una gran cantidad de ROS mientras sintetiza atp, mientras que El Nadh se regenera en nad +. La mayoría de las reacciones de oxidación en la descomposición de los tres principales metabolitos del azúcar, los lípidos y las proteínas se completan a través de este sistema. El contenido de nad (h) y la relación Nadh / nad + se pueden utilizar para evaluar la fuerza de la Glucólisis y el ciclo tca. La mayor relación nad (h) y Nadh / nad + indica que las células consumen más oxígeno respiratorio y están en un Estado de peroxidación. Además, el aumento de la relación Nadh / nad + también puede inhibir la Glucólisis y la circulación de tca. Además, los productos de degradación nad + juegan un papel importante en la regulación de la transmisión de señales celulares, el metabolismo y la expresión genética. Principio de determinación Extracción de nad + y Nadh de la muestra con extractores ácidos y alcalinos, respectivamente. Nadh reduce el azul tiazol oxidativo (mtt) a un Zan a través de la entrega de hidrógeno de PMS y detecta el valor de absorción de luz a 570 nm; Por su parte, nad + se puede reducir a Nadh por etanol deshidrogenasa, que se detecta aún más mediante el método de reducción mtt. Instrumentos y suministros propios Espectrómetro visible, centrífuga de mesa, pipeta, placa de Petri de vidrio de 1 ml, mortero, hielo y agua destilada. |
Instrumentos y suministros necesarios:
Espectrómetro visible, placa de Petri de vidrio de 1 ML (diámetro óptico de 1 cm), centrífuga de baja temperatura, pipeta, mortero, hielo y agua destilada
4. determinación de la Superóxido dismutasa (sod):
Se recomienda seleccionar dos muestras para la predicción antes del experimento formal, comprender la situación de este lote de muestras, familiarizarse con el proceso experimental y evitar el experimento.
¡Desperdicio de muestras y reactivos!
1. preparación de muestras
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① muestra de tejido: Tomar alrededor de 0,1 g de tejido (se recomienda 0,25 g para muestras bien hidratadas), añadir 1 ml de extracto y hacerlo a 4ºC o en un baño de hielo Homogeneizador (o uso de varios homogeneizadores comunes). Centrifugar a 4ºC × 12000 RPM durante 10 minutos y tomar el líquido superior como líquido a medir. [nota]: si se aumenta el tamaño de la muestra, se puede extraer de acuerdo con la masa del tejido (g): el volumen del extracto (ml) es de 1: 5 a 10. |
② muestras de bacterias / células: Primero se recogen bacterias o células en el tubo centrífuga, se centrifuga y luego se abandona el sobrenadante; Añadir 1 ml de aproximadamente 5 millones de bacterias o células Extracto, ultrasonido para romper bacterias o células (baño de hielo, Potencia 200w, ultrasonido 3s, intervalo 10s, repetición 30 veces); 12000 RPM 4 ℃ centrifugación durante 10 minutos, tomar y limpiar, poner hielo para medir. [nota]: si se aumenta el tamaño de la muestra, se puede seguir el número de bacterias / células (10) 4): el líquido de extracción (ml) se extrae en una proporción de 500 a 1000: 1. ③ muestra de líquido: detección directa; En caso de turbidez, se extrae el suero para su detección después de la centrifugación. |

Metodología experimental:
I. preparación de heparina:
Se venden 140 unidades / mg de polvo liofilizado de Heparina en el mercado, 1 gramo de botella, 140.000 unidades por botella, se pesan 0,1 gramos de polvo liofilizado de heparina, se añaden 5 ml de solución salina normal y se combinan en 2.800 unidades / ML. se toman 50 a 100 μl de pared de tubo húmeda, que puede anticoagular 3 a 5 ml de sangre humana y la sangre no se coagulará. La sangre de rata se solidifica fácilmente, por lo que es mejor que sea más espesa. Se puede tomar 0,1 gramos de polvo liofilizado de heparina, disolverlo con 3 ml de solución salina normal, tomar 50 a 100 μl, que puede anticoagular 2 a 4 ml de sangre de rata.
Preparación del tubo anticoagulante de heparina: tomar 0,1 gramos de polvo liofilizado de Heparina y agregar 2,5 ml de solución salina normal. Tomar 100 a 150 μl y gotear en un tubo de plástico o vidrio, humedecer la pared del tubo, en un horno pequeño por debajo de 80 ° c (se puede usar un horno pequeño para hornear pan), girar horizontalmente, girar cada 5 a 10 minutos, hasta que se seque y se almacene a 4 ° c, lo que puede hacer que 2 a 5 ml de sangre no se congele.
2. recogida de muestras de sangre:
De acuerdo con las condiciones de recolección, toda la sangre se divide en anticoagulante y anticoagulante. Al mismo tiempo, el líquido amarillo superior separado sin anticoagulación lo llamamos suero; El líquido amarillo superior aislado por anticoagulación lo llamamos plasma.
1. recolección de suero sin anticoagulación: toda la sangre recolectada se dejará reposar durante 1 a 2 horas, y el sangrado se separará directamente por centrifugación de baja velocidad para su uso o conservación.
2. recolección de plasma anticoagulante: recolección de sangre entera anticoagulante, después de invertir suavemente la anticoagulación completa, el plasma se puede separar directamente por centrifugación de baja velocidad (también se puede dejar reposar durante aproximadamente media hora y luego por centrifugación de baja velocidad) para su uso o conservación. De acuerdo con las características de rendimiento de los diferentes anticoagulantes, se seleccionan los Anticoagulantes adecuados. Los Anticoagulantes comunes en el laboratorio son varias sales de heparina, EDTA Y.
Precauciones para elegir la anticoagulación:
①. la cantidad de Anticoagulantes añadidos a cada muestra debe ser la misma, y la cantidad de sangre entera tomada también debe ser la misma en la medida de lo posible;
②. después de recoger toda la sangre anticoagulante, debe invertirse suavemente, anticoagulante completamente para evitar que parte de la sangre no esté expuesta al anticoagulante y conduzca a la coagulación;
③. la sangre entera anticoagulante recoge relativamente más plasma (1 ml de sangre entera anticoagulante puede separar 0,4 a 0,5 ml de plasma);
④. después de la congelación y conservación del plasma recogido por anticoagulación, puede haber turbidez floculante al descongelar, y si es necesario, es necesario centrifugar para eliminar la turbidez.
Se utiliza para la determinación.
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Anticuerpos del gen de migración de células B btg1 1
Bean1 proteína ataxia medular cerebelosa bean1 anticuerpos
Precauciones:
1. el segundo reactivo es una enzima, que no se puede congelar y se coloca en el hielo cuando se utiliza.
2. solo se necesita un tubo para el Cuidado.
3. si el valor de absorción de luz del tubo de iluminación es superior a 2, se recomienda diluir el reactivo con agua destilada secundaria 7 veces antes de usarlo (10 μl de líquido secundario del reactivo + 60 μl de agua destilada).
¿4. ¿ por qué algunos tubos de determinación de muestras de SOD son mayores que los de cuidado correcto y en qué rango están los valores de cuidado correcto?
El rango de atención es de 0,8 - 2. El valor de absorción de luz demasiado bajo para el cuidado puede ser (1) el reactivo 2 o el reactivo 4 no están disponibles; (2) no se agregaron reactivos en orden; (3) el tiempo de reacción no es suficiente y se puede prolongar (el tiempo de reacción se puede extender de 30 minutos a 40 minutos). El valor de absorción de luz excesivo del tubo de atención puede ser que el reactivo 2 no haya diluido el múltiplo correspondiente de acuerdo con las instrucciones de operación.
Si el tubo de determinación es mayor que el cuidado, puede ser que el impacto de las impurezas en la muestra sea demasiado grande. para reducir el impacto de las impurezas, el líquido superior de extracción de la muestra generalmente se diluye 10 veces con agua destilada o extracto antes de la medición, lo que generalmente hace que la determinación sea normal. En la fórmula de cálculo, se multiplica por el múltiplo de dilución correspondiente.