Pasos de operación del kit de detección de inmunoglobulina secretada bovina aelisa:

1. dilución y muestra de productos estándar: 10 agujeros de productos estándar se colocan en la placa de cubierta del paquete estándar de la enzima, 100 μl de productos estándar se agregan en el primer y segundo agujeros de di, respectivamente, y luego 50 μl de diluyente de productos estándar se agrega en el primer y segundo agujeros de di, y se mezcla bien; Luego, se toman 100 μl del primer y segundo agujero de di y se añaden al tercer y cuarto agujero, respectivamente, y luego se añade 50 μl de diluyente estándar al tercer y cuarto agujero, respectivamente, y se mezcla bien; Luego, se desechan 50 μl en el tercer y cuarto agujero, y luego se agregan 50 μl en el séptimo y octavo agujero, respectivamente, y luego se agrega 50 μl en el séptimo y octavo agujero, y se mezcla bien, se agrega 50 μl en el quinto y sexto agujero, y luego se agrega 50 ul en el quinto y sexto agujero, respectivamente, y se mezcla bien; Después de mezclar, se toman 50 μl del quinto y sexto agujero y se añaden al noveno y décimo agujero, respectivamente, y luego se añade 50 μl de dilución estándar al noveno y décimo agujero, y después de mezclar, se toman 50 μl del noveno y décimo agujero para descartarlo. (después de la dilución, la cantidad de muestra en cada agujero es de 50 μl, y la concentración es de 180 ng / l, 120 ng / l, 60 ng / l, 30 ng / l, 15 ng / l, respectivamente).

2. añadir muestras: establecer agujeros en blanco (los agujeros de control en blanco no agregan muestras y reactivos estándar enzimáticos, el resto de los pasos son los mismos) y los agujeros de muestra a medir. Añadir 40 μl de diluyente de muestra al agujero de la muestra a medir en la placa de cubierta del paquete enzimático, y luego 10 μl de la muestra a medir (la dilución final de la muestra es 5 veces). Añadir la muestra a la parte inferior del agujero de la placa estándar de la enzima, tratar de no tocar la pared del agujero, sacudir suavemente y mezclar bien.

3. educación caliente: sellar la placa con película de sellado y colocarla a 37 ° C durante 30 minutos.

4. dispensación: diluir el detergente concentrado 30 veces (20 veces de 48t) con agua destilada 30 veces (20 veces de 48t) y reservarlo.

5. lavado: quitar cuidadosamente la película de sellado, descartar el líquido, secar, llenar cada agujero con líquido de lavado, Dejar reposar durante 30 segundos y descartarlo, repetirlo 5 veces, palmaditas secas.

6. adición de enzima: añadir 50 μl de reactivo estándar de enzima a cada agujero, excepto el agujero en blanco.

7. Wen yu: la operación es la misma 3.

8. lavado: operación 5.

9. color: primero agregue el agente de color A50 μl por agujero, luego agregue el agente de color b50 μl, agite suavemente y mezcle bien, evite la luz y el color a 37 ° C durante 15 minutos.

10. terminación: 50 μl de líquido de terminación por agujero para detener la reacción (en este momento, el azul se convierte en amarillo).

11. determinación: la absorción (valor de od) de cada agujero se mide secuencialmente con una longitud de onda de 450 nm de aire acondicionado en blanco cero. La determinación debe realizarse 15 minutos después de agregar el líquido de terminación.