Células endoteliales de la válvula cardíaca porcina

Células endoteliales de la válvula cardíaca porcina

Atributos del producto:

Perfil de la célula:

El epitelio de la válvula cardíaca porcina se separa del tejido de la válvula cardíaca; El corazón es un órgano importante del cuerpo de los vertebrados, cuya función principal es proporcionar presión para el flujo sanguíneo y transportarlo a todas las partes del cuerpo. El corazón está compuesto por el músculo cardíaco, con cuatro cámaras: atrio izquierdo, ventrículo izquierdo, Atrio derecho y ventrículo derecho. Las aurículas izquierda y derecha están separadas por intervalos y, por lo tanto, no están conectadas entre sí. hay válvulas (válvulas atrioventriculares) entre las aurículas y los ventrículo, que permiten que la sangre solo fluya de las aurículas a los ventrículo y no hacia atrás. La función del corazón es impulsar el flujo sanguíneo, proporcionar un flujo sanguíneo adecuado a los órganos y tejidos para suministrar oxígeno y diversos nutrientes, y quitar los productos finales del metabolismo (como dióxido de carbono, sales inorgánicas, urea y ácido úrico, etc.) para que las células mantengan un metabolismo y una función normales. El papel de las válvulas cardíacas en la actividad de la circulación sanguínea que se detiene en el corazón es común y clave: las válvulas son equivalentes a los porteros, evitando que la sangre regrese a los ventrículo que acaban de salir. Hay válvulas entre la aurícula y el ventrículo, entre el ventrículo y los vasos sanguíneos que salen del ventrículo. Después de que la sangre fluye, el problema común de que la válvula se cierra es el prolapso de la válvula mitral, la palabra "válvula mitral" proviene de la "corona episcopal", que es el sombrero que lleva el obispo y tiene dos puntas. Las válvulas situadas entre la aurícula izquierda y el ventrículo izquierdo no pueden cerrarse normalmente.

Introducción al método:

Meridiano vascular de la válvula cardíaca porcina aislado por el laboratorio de la compañíaCD31Identificación por inmunofluorescencia, con una pureza alcanzable90%Lo anterior y no contieneEl VIH-1,VHB,VHC, micoplasma, bacterias, levadura y hongos, etc.

Pruebas de calidad:

El epitelio de la válvula cardíaca porcina aislado por el laboratorio de la compañía fue-La colagenasa combinada con el método digestivo combinado con el método de adhesión diferencial a la pared y la preparación a través del cultivo y selección de medios de cultivo especiales para células endoteliales, el número total de células es de aproximadamente5×105 células/Botella.

Información de formación:

Condiciones del sobrePLL()0,1 mg / ml), gelatina0,1%(...)

El medio de cultivo contieneFBS, aditivos para el crecimiento,penicilina,estreptomicinaesperar

Frecuencia de cambio de líquido por cada2 - 3Cambiar el líquido una vez al día

Características de crecimiento pegadas a la pared

Morfología celular similar a las células endoteliales

Las características de transmisión se pueden transmitir.2 - 3generación

Líquido digestivo0,25%

Fase gaseosa de las condiciones de cultivo: aire,95%V;CO2，5%

Líneas celulares vs de células primarias:

Células aisladas directamente de tejidos humanos o animales por métodos enzimáticos o mecánicos. Estrictamente hablando, las células aisladas del cuerpo hasta antes de la transmisión se llaman células primarias, y la mayoría de las células primarias pueden dividirse 10 - 15 veces in vitro (esto está relacionado con la longitud de los telómeros de la célula), junto con factores como la extracción de materiales y el costo, generalmente se denominan células primarias de la primera a la Décima generación cultivadas.

Las células primarias generalmente se transmiten a unas 10 generaciones, la mayoría de las células envejecen y mueren, pero muy pocas células pueden superar la "crisis" y continuar transmitiéndose, y las células sobrevivientes generalmente pueden transmitirse a 40 - 50 generaciones, llamadas líneas celulares. Cuando hay una "crisis" después de la generación 50, hay algunas células en las que el material genético se altera y tiene las características de cáncer, por lo que puede transmitirse sin restricciones, conocidas como líneas celulares.

También se cree que las líneas celulares se refieren a los grupos celulares que se reproducen después de que los cultivos celulares primarios se transmiten con éxito. También se refiere a las células cultivadas que pueden transmitirse continuamente durante mucho tiempo. Por lo tanto, se extienden las líneas celulares limitadas posteriores y las líneas celulares infinitas, por lo que las líneas celulares se refieren en sentido estrecho a las células que se pueden transmitir continuamente y, en sentido amplio, a las células que se pueden transmitir. Por su parte, las líneas celulares se denominan líneas celulares cuando se obtiene de cultivos o líneas celulares primarias una sola célula con propiedades o marcadores especiales mediante el método de selección o el método de formación de clones.

Las líneas celulares tienen las ventajas de fácil cultivo, muchos tipos, bajo precio y transmisión infinita, y también son muy propensas a la identificación errónea y la contaminación cruzada en el cultivo y la congelación.

Pasos específicos para el cultivo de células primarias:

1. preparación: tome todo tipo de productos de cultivo desinfectados y Póngalos en la Mesa de purificación, y desinfecte con rayos ultravioleta durante 20 minutos. Lávese las manos y limpie las manos hasta el codo con un 75% de alcohol antes de comenzar el Trabajo.

2. diseño: encienda la lámpara de alcohol e instale el sombrero de la pajita.

3. tratamiento del tejido: coloque el bloque de tejido en un vaso de precipitados y enjuague 2 - 3 veces con solución Hanks para eliminar la contaminación sanguínea; Si se sospecha que el tejido puede contaminarse, se puede colocar primero en una mezcla que contenga verde durante 30 - 60 minutos.

5. digestión: se puede digerir en baño de agua a temperatura constante o en una incubadora de 37 ° c. la digestión debe sacudirse cada 20 minutos, como es mejor digerir con una batidora de temperatura constante electromagnética. El tiempo de digestión depende del tamaño del bloque tisular y la dureza del tejido.

6. separación: cuando se ve turbidez en el líquido digestivo durante la digestión, se puede aspirar un poco de líquido digestivo con una pajita para observar bajo el microscopio, si el tejido se ha dispersado en grupos celulares o células individuales, se termina inmediatamente la digestión y luego se filtran los bloques de tejido que aún no se han digerido completamente a través de Un tamiz adecuado de acero inoxidable. Centrifugar el líquido digestivo a baja velocidad (500 - 1000 rpm) durante 5 minutos, aspirar el suero superior y agregar una cantidad adecuada de medio de cultivo que contiene suero.

7. conteo: contar con una placa de conteo, como la densidad celular de la suspensión celular es demasiado grande, y después de complementar el medio de cultivo y ajustarlo, se carga en el frasco de cultivo. Para la mayoría de las células, el pH requiere un rango de 7,2 - 7,4, y el medio de cultivo es ligeramente rojo, como el color amarillo, lo que indica que el líquido se vuelve ácido y se puede ajustar con nahco3.

8. cultivo: cultivo en una incubadora de 37 ° c, si se cultiva en una incubadora de co2, la boca de la botella debe bloquearse con un tapón de algodón de gasa o un sombrero espiral, el tapón de gasa es propenso al moho, y el tapón nuevo debe cambiarse cada vez que se cambia el líquido.

Productos que la compañía está vendiendo:

Solución de conservación de ADN de hisopo no congelado (tipo a)

Solución de conservación de ADN de hisopo no congelado (tipo b)

Solución de conservación de ADN de sangre no congelada (100 ml)

Solución de conservación de ADN de sangre no congelada (250 ml)

Solución de conservación de ADN de tejido no congelado (100 ml)

Lisado de glóbulos rojos tipo a (purificación de ácido nucleico)

Lisado de glóbulos rojos tipo B (para análisis de células de flujo)

Eliminador de LPS bacterianos

Eliminador de ácido húmico del suelo

Eliminador de parafina centrífuga de un solo paso

Extracción de ADN animal

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