Células endoteliales microvasculares del corazón porcino

Líneas celulares vs de células primarias:

Células aisladas directamente de tejidos humanos o animales por métodos enzimáticos o mecánicos. Estrictamente hablando, las células aisladas del cuerpo hasta antes de la transmisión se llaman células primarias, y la mayoría de las células primarias pueden dividirse 10 - 15 veces in vitro (esto está relacionado con la longitud de los telómeros de la célula), junto con factores como la extracción de materiales y el costo, generalmente se denominan células primarias de la primera a la Décima generación cultivadas.

¿‍ sí?Células endoteliales microvasculares del corazón porcino

Atributos del producto:

Perfil de la célula:

El epitelio microvascular del corazón porcino se separa del tejido cardíaco; El corazón es un órgano importante del cuerpo de los vertebrados, cuya función principal es proporcionar presión para el flujo sanguíneo y transportarlo a todas las partes del cuerpo. El corazón está compuesto por el músculo cardíaco, con cuatro cámaras: atrio izquierdo, ventrículo izquierdo, Atrio derecho y ventrículo derecho. Las aurículas izquierda y derecha están separadas por intervalos y, por lo tanto, no están conectadas entre sí. hay válvulas (válvulas atrioventriculares) entre las aurículas y los ventrículo, que permiten que la sangre solo fluya de las aurículas a los ventrículo y no hacia atrás. La función del corazón es impulsar el flujo sanguíneo, proporcionar un flujo sanguíneo adecuado a los órganos y tejidos para suministrar oxígeno y diversos nutrientes, y quitar los productos finales del metabolismo (como dióxido de carbono, sales inorgánicas, urea y ácido úrico, etc.) para que las células mantengan un metabolismo y una función normales. Las células endoteliales microvasculares cardíacas son células similares a la piel plana de una sola capa que componen la superficie de la cavidad microvascular cardíaca. las sustancias bioactivas que produce y secreta juegan un papel importante en el mantenimiento de la tensión vascular, la regulación de la presión arterial y la antitrombótica, y tienen una importancia fisiológica importante en la patogénesis de las enfermedades vasculares cardíacas. En los últimos años, un gran número de estudios han demostrado que los cambios funcionales y patológicos de las células endoteliales microvasculares del músculo cardíaco afectan directamente la función de las células miocárdicas y también son objetivos importantes como muchas toxinas, factores inflamatorios y virus. como modelo celular estudiado in vitro, se encuentra en la isquemia miocárdica.-Desempeña un papel importante en el estudio de la patogénesis de la reperfusión y la secreción intercellular de factores de crecimiento celular.

Introducción al método:

Meridiano endoteliales microvascular del corazón porcino aislado de laboratorioCD31Identificación por inmunofluorescencia, con una pureza alcanzable90%Lo anterior y no contieneEl VIH-1,VHB,VHC, micoplasma, bacterias, levadura y hongos, etc.

Pruebas de calidad:

El epitelio microvascular del corazón porcino aislado en laboratorio utiliza colagenasa-El método de digestión Mixta se combina con el método de centrifugación de gradiente de densidad y luego se prepara mediante el cultivo y la selección de medios de cultivo especiales para células endoteliales. el número total de células es de aproximadamente5×105 células/Botella.

Información de formación:

Condiciones del sobre:PLL()0,1 mg / ml), gelatina0,1%(...)

Medios de cultivo: medios básicos, incluidosFBS,FEG,bFGF,IGF,VEGF,heparina,Hidrocortisona,penicilina,estreptomicinaesperar

Frecuencia de cambio de líquido: cada2 - 3Cambiar el líquido una vez al día

Características de crecimiento: pegado a la pared

Morfología celular: similar a las células endoteliales

Características de la transmisión: transmisibles2 - 3generación

Líquido digestivo:0,25%

Condiciones de cultivo: fase gaseosa: aire,95%V;CO2，5%

Las células primarias generalmente se transmiten a unas 10 generaciones, la mayoría de las células envejecen y mueren, pero muy pocas células pueden superar la "crisis" y continuar transmitiéndose, y las células sobrevivientes generalmente pueden transmitirse a 40 - 50 generaciones, llamadas líneas celulares. Cuando hay una "crisis" después de la generación 50, hay algunas células en las que el material genético se altera y tiene las características de cáncer, por lo que puede transmitirse sin restricciones, conocidas como líneas celulares.

También se cree que las líneas celulares se refieren a los grupos celulares que se reproducen después de que los cultivos celulares primarios se transmiten con éxito. También se refiere a las células cultivadas que pueden transmitirse continuamente durante mucho tiempo. Por lo tanto, se extienden las líneas celulares limitadas posteriores y las líneas celulares infinitas, por lo que las líneas celulares se refieren en sentido estrecho a las células que se pueden transmitir continuamente y, en sentido amplio, a las células que se pueden transmitir. Por su parte, las líneas celulares se denominan líneas celulares cuando se obtiene de cultivos o líneas celulares primarias una sola célula con propiedades o marcadores especiales mediante el método de selección o el método de formación de clones.

Las líneas celulares tienen las ventajas de fácil cultivo, muchos tipos, bajo precio y transmisión infinita, y también son muy propensas a la identificación errónea y la contaminación cruzada en el cultivo y la congelación.

Productos que la compañía está vendiendo:

Receptor de la Hormona liberadora de gonadotrofina de ratónELISA (GHR)Kit96T / 48T

Kit de ELISA de factor IX de coagulación en rata (FIX)RatasIX(FIX)ELISAKit

Fragmento Complejo Humano4a, C4aELISAKitToxinas alérgicas humanas/.Fragmento del complementoELISA de 4(C4a)Kit96T / 48TEmbalaje importado

Factor de crecimiento básico de fibroblasto humano9, bFGF-9ELISAKit factor básico de crecimiento fibroblástico humanoELISA de 9(bFGF-9)Especificaciones del kit:96T / 48T

Kit de detección cuantitativa de Amilosa vegetal por Colorimetría20vez

Humaerminaldeoxinucleotidillansferasa, TdTELISAKitDesoxinucleótido terminal humano transferasaELISA (TdT)Especificaciones del kit:96T / 48T

豚鼠内皮素1(ET-1)ELISAKit Elisa. 96T / 48T

Inmunoglobulina de cobayaELISAKit de E(IgE) Elisa. 96T / 48T

Inmunoglobulina de cobayaUna visión completamente civilizada Elisa. 96T / 48T

Inhibidor de la proteasa metálica de la matriz de cobaya1 (TIMP-1) ELISAKit Elisa. 96T / 48T

Soluble en ratasELISA de CD80(sCD80)Kit, nombre en inglés:Kit de ELISA sCD80

Kit de ELISA desmin (Des) del ratónProteína de nudo de ratón(Des)ELISAKit

RatónAlaninaaminoansferasa, ALTELISAKitAminotransferasa de ratónELISA (ALT)Kit96T / 48TEmbalaje importado

Hormona paratiroideaEspecificaciones de la hormona paratiroidea humana:48T / 96T

Actividad de la telómera celular marcada por isótoposAPKit de análisis electroquímico10vez

ELISAKitPI3KRatas0Inositol ácido3Especificaciones de la quinasa:48T / 96T

LY9Ratones recombinantesLY9 / CD229 / SLAMF3Proteína(SuetiquetaProteína

AMH/MIS MuellerianAntígeno del factor inhibidor1mgAMH/MIS MuellerianoAntígeno del factor inhibidor

ANGPTL4ReorganizadorANGPTL4Proteína(FcetiquetaProteína

FLRT1 Proteína humanaReorganizadorFLRT1Proteína(Suetiqueta(...)

Proteína HEPACAM2 RataRatas recombinantesHepaCAM2Proteína(Suetiqueta(...)

Células endoteliales microvasculares del corazón porcinoLectina de Galactosa4 (GAL4)Proteína recombinanteGalectina recombinante 4 (GAL4)

FLRT1 Proteína humanaReorganizadorFLRT1Proteína(Suetiqueta(...)

ACPPRatones recombinantesÁcido prostático fosfatasa / ACPPProteína(SuetiquetaProteína

Proteína IFNGR1 CynomolgusMono cangrejo recombinanteIFNGR / IFNGR1Proteína(Suetiqueta(...)

AK4ReorganizadorAK4 / Adenilato quinasa 4 / AK3L1ProteínaProteína

Pasos específicos para el cultivo de células primarias:

1. preparación: tome todo tipo de productos de cultivo desinfectados y Póngalos en la Mesa de purificación, y desinfecte con rayos ultravioleta durante 20 minutos. Lávese las manos y limpie las manos hasta el codo con un 75% de alcohol antes de comenzar el Trabajo.

2. diseño: encienda la lámpara de alcohol e instale el sombrero de la pajita.

3. tratamiento del tejido: coloque el bloque de tejido en un vaso de precipitados y enjuague 2 - 3 veces con solución Hanks para eliminar la contaminación sanguínea; Si se sospecha que el tejido puede contaminarse, se puede colocar primero en una mezcla que contenga verde durante 30 - 60 minutos.

5. digestión: se puede digerir en baño de agua a temperatura constante o en una incubadora de 37 ° c. la digestión debe sacudirse cada 20 minutos, como es mejor digerir con una batidora de temperatura constante electromagnética. El tiempo de digestión depende del tamaño del bloque tisular y la dureza del tejido.

6. separación: cuando se ve turbidez en el líquido digestivo durante la digestión, se puede aspirar un poco de líquido digestivo con una pajita para observar bajo el microscopio, si el tejido se ha dispersado en grupos celulares o células individuales, se termina inmediatamente la digestión y luego se filtran los bloques de tejido que aún no se han digerido completamente a través de Un tamiz adecuado de acero inoxidable. Centrifugar el líquido digestivo a baja velocidad (500 - 1000 rpm) durante 5 minutos, aspirar el suero superior y agregar una cantidad adecuada de medio de cultivo que contiene suero.

7. conteo: contar con una placa de conteo, como la densidad celular de la suspensión celular es demasiado grande, y después de complementar el medio de cultivo y ajustarlo, se carga en el frasco de cultivo. Para la mayoría de las células, el pH requiere un rango de 7,2 - 7,4, y el medio de cultivo es ligeramente rojo, como el color amarillo, lo que indica que el líquido se vuelve ácido y se puede ajustar con nahco3.

8. cultivo: cultivo en una incubadora de 37 ° c, si se cultiva en una incubadora de co2, la boca de la botella debe bloquearse con un tapón de algodón de gasa o un sombrero espiral, el tapón de gasa es propenso al moho, y el tapón nuevo debe cambiarse cada vez que se cambia el líquido.