Medio de cultivo especial para células de melanoma humano a2058

A2058Medio de cultivo especial para células de melanoma humano

Perfil del producto:

El medio de cultivo especial para células a2058 está cuidadosamente optimizado por el equipo técnico. después de pruebas a largo plazo, este producto puede mantener un buen estado de crecimiento de las células a2058. Este producto ya contiene varios ingredientes necesarios para el crecimiento de las células a2058, sin necesidad de agregar ningún ingrediente, y se puede utilizar directamente en el cultivo in vitro de las células a2058. Este producto es solo para investigación científica adicional y no se puede utilizar para diagnóstico, tratamiento, clínica, familia y otros fines.

Pasos específicos del cultivo celular:

I. equipo de uso común

1. Equipo de la Sala de preparación

Destilador de agua destilada única, destilador de agua destilada doble, cilindro ácido, horno, olla a presión, Gabinete de almacenamiento (colocación de artículos no desinfectados), Gabinete de almacenamiento (colocación de artículos desinfectados), Mesa de embalaje. Equipo de la Cámara de distribución: balanza de torsión y balanza electrónica (pesaje de medicamentos),PHMedidor (líquido de cultivo para la medición)PHValor), agitador magnético (configurar la solución de agitación de la Cámara de solución).

2. Equipo de la Sala de cultivo

Tanques de nitrógeno líquido, armarios de almacenamiento (para almacenar escombros), lámparas fluorescentes y ultravioleta, sistemas de purificadores de aire, refrigeradores de baja temperatura..-80℃), aire acondicionado, botella de cilindro de dióxido de carbono, Mesa lateral (escribe registros experimentales).

3. Equipos que deben colocarse en salas estériles

Centrifugadora (recogida de células), Mesa de trabajo ultralimpia, microscopio invertido,CO2Incubadora (cultivo de incubación), olla de baño de agua, máquina de desinfección y esterilización de oxígeno,4℃Refrigerador (colocaciónsueroY el líquido de cultivo).

II. operaciones estériles

(1) esterilización en salas estériles

1.Limpiar regularmente la Sala estéril: limpiar una vez a la semana, primero fregar el suelo con agua del grifo, limpiar la mesa, limpiar la Mesa de trabajo, etc., y luego usar3 ‰Ven a sur o a New Jerusalem o0.5Limpiar con ácido peracético al%.

2.CO2Esterilización en incubadora (incubadora): primero3 ‰Limpiar con xinjieer y luego usar75Limpiar con alcohol o0.5ácido peracético al% y luego irradiarlo con una lámpara ultravioleta.

3.Esterilización antes del experimento: encienda la luz ultravioleta, la esterilizadora de oxígeno y el sistema de purificador de aire.20 - 30Min.

4.Esterilización después del experimento: con75% alcohol..3 ‰Xinjielmai) limpiar la Plataforma de ultralimpieza, la Plataforma lateral y la Plataforma de carga del microscopio invertido.

Métodos de cultivo celular:

01 Pasos de la operación de cultivo primario

Los pasos operativos del cultivo primario son: tomar materiales→Separación→Cultivo.

（1) materiales: hay diferentes métodos de extracción para diferentes tejidos, pero todos deben mantener los materiales frescos y estrictamente estériles.

Los pasos de la operación de cultivo celular son los siguientes:

（1) Observar la morfología celular y la densidad de crecimiento bajo un microscopio invertido antes de la transmisión, cuando la densidad de crecimiento celular alcanzaEntre el 80% y el 90%En ese momento, se puede transmitir de generación en generación.

（2) aspirar o verter el medio de cultivo en el frasco de cultivo. UnirsePBSlimpiar1 a 2Esta vez, sacude suavemente a la izquierda y a la derecha y tíralo.

（3) añadir una cantidad adecuada de contenido a la botella de acuerdo con el tamaño de la botella de cultivo.EDTASi es así, generalmente debe cubrir todo el Fondo del frasco de cultivo.

（4) coloque el frasco de cultivo37℃ CO2La incubadora para la digestión,2 ~ 5 minutosDespués de sacarlo y ponerlo bajo un microscopio invertido para observación, cuando se encontró que habíaEntre el 70% y el 80%Cuando la contracción celular se redondea y el espacio entre las células se hace más grande, se golpea suavemente el frasco de cultivo para que las células restantes se desprendan y luego se añaden inmediatamente.2Doble cantidad de medio de cultivo para suspender la digestión, soplar suavemente con la cabeza de succión y mezclar uniformemente para evitar la digestión excesiva.

（5) aspirar toda la suspensión celular en un tubo centrífuga,1000rpm / minCentrifugadora3 ~ 5 minutos.

（6Abandone el sobrenadante, agregue una cantidad adecuada de medio de cultivo para suspender las células, sople suavemente y mezcle bien, para que las células se dispersen uniformemente.

（7Absorber la cantidad adecuada de suspensión celular con una cabeza de succión, vacunarse en un nuevo frasco de cultivo con una densidad adecuada, complementar el medio de cultivo, Sacudirlo y colocarlo en37℃ CO2El cultivo se realiza en una incubadora.

（8) determinar el tiempo de cambio o paso de acuerdo con el Estado de crecimiento celular, e incluso congelar la célula.

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Precauciones:

（1) llevar a cabo una operación estéril estricta, todos los reactivos y consumibles utilizados deben ser estériles, y deben ser expuestos a la luz ultravioleta en la Mesa de trabajo estéril y súper limpia.30 minutosLo anterior para evitar la contaminación celular.

（2) el medio de cultivo utilizado debe ser adecuado para la supervivencia y el crecimiento celular. Las células originarias de diferentes especies animales y tipos de tejidos requieren diferentes medios de cultivo, y si es necesario, se puede seleccionar el medio de cultivo adecuado mediante métodos preexperimentales.

（3El suero bovino fetal juega un papel clave en el mantenimiento de la supervivencia celular y la promoción del crecimiento celular. El suero bovino fetal adecuado se puede seleccionar de acuerdo con la literatura o el experimento previo. Una vez determinado, debe mantenerse hasta que se complete el experimento.

（4(al digerir las células, se debe evitar que el tiempo de digestión demasiado corto conduzca a la digestión no, el número de células recogidas sea pequeño, o el tiempo de digestión demasiado largo conduzca a la libre floculación de las células, cuando las células han sido dañadas o muertas, afectando el número de células y el progreso experimental.

（5) al centrifugar las células, se debe evitar que el número de células recogidas por una fuerza centrífuga demasiado pequeña no sea suficiente, o que la fuerza centrífuga demasiado grande cause daño a las células. Después de que la precipitación celular después de la centrifugación se abandona y se elimina el sobrenadante, primero se debe expulsar la precipitación celular, y luego se debe agregar el medio de cultivo para volver a colgar, lo que puede mejorar la viabilidad celular con un menor daño celular que el soplado directo.

（6) al soplar las células, se debe tratar de evitar la producción de células para no dañar las células y afectar el Estado celular (parte residual del líquido durante el soplado puede reducir la producción de burbujas en la cabeza de succión).